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  • 细胞被支原体污染,该怎么办?

    2023-10-18 支原体是目前为止发现的最小的原核生物,支原体污染一般在显微镜下不可见,很难察觉,但细胞会受到极大的损伤,主要通过以下途径影响细胞生长及功能。那么细胞被支原体污染,该怎么办呢?让我们一起来看看吧!一、支原体污染的来源1.环境污染:如细胞培养房、细胞培养箱、超净工作台内已被支原体污染;2.实验器材的污染:移液枪、移液管、细胞培养皿、水浴锅等;3.细胞培养试剂的污染:培养基、胰酶、血清、细胞冻存液等;二、处理方法1.及时更换培养液:可以减缓支原体的污染,但不能wan全清除;2.使用...
  • 夹心法与竞争法的ELISA检测原理是什么?

    2023-10-18 ELISA的原理是以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。在实际应用中,通过不同的设计,具体的方法步骤可有多种。那么你知道夹心法与竞争法的ELISA检测原理是什么吗?让我们一起来看看吧!一、夹心法原理夹心法使用的是两个抗体夹抗原或者两个抗原夹抗体的方法,这种复合物被称之为三明治夹心结构,利用一对配对wan全的抗体,可以特异性检测抗原,当然主要针对的是具有至少2个以上抗原表位的抗原,抗体的配对可是门技术活,很多公...
  • 直接法与间接法的ELISA检测原理是什么?

    2023-10-18 在实际应用中,通过不同的设计,具体的方法步骤可有多种。即:用于检测抗体的间接法、用于检测抗原的双抗体夹心法以及用于检测小分子抗原或半抗原的抗原竞争法等等。那么你知道直接法与间接法的ELISA检测原理是什么吗?让我们一起来看看吧!一、直接法原理直接法是利用包被抗原,检测抗体或者进行重组蛋白的活性验证,利用蛋白与板材(即微孔板底)通过疏水键、流水/离子键的被动吸附,通过引入其它活性基团如氨基和碳基的共价结合,以及通过表面改性后的亲水键结合等等,当然也有利用亲和素预包被的板材,通过...
  • 细胞凋亡与细胞坏死的不同点有哪些?

    2023-10-17 你知道细胞凋亡与细胞坏死的不同点有哪些吗?让我们一起来看看吧!一、定义细胞凋亡:细胞凋亡是一种正常的基因程序性细胞死亡,其中衰老细胞在其生命周期结束时收缩,其剩余片段被吞噬而没有任何炎症反应。细胞坏死:坏死是由于存在外部因素(如真菌或细菌毒素)而产生的信号导致细胞过早死亡。二、诱导细胞凋亡:当细胞发出DNA损伤或促凋亡和抗凋亡蛋白失衡的信号时,它就会被诱导。细胞坏死:它是由感染、外伤和毒素等外部存在因素引起的。三、形态变化细胞凋亡:可能会发生膜出血,但会保持膜的完整性。细胞坏...
  • ELISA实验结果异常的因素有哪些?

    2023-10-17 ELISA运用了免疫学原理和化学反应显色原理,需要将抗原或抗体预包被在固相载体表面,使后来形成的抗原-抗体-酶(荧光基团)-底物复合物黏附在载体上,通过检测OD值或发光值,来检测靶蛋白的含量。ELISA适合用于定量检测胞外的分泌性蛋白,检测大分子抗原和特异性抗体等。那么ELISA实验结果异常的因素有哪些呢?让我们一起来看看吧!一、样品样品是检测的前提,样品质量会直接影响实验结果。可以用ELISA来检测的样品很多,根据检测项目不同可以是血清、血浆、唾液、尿液等,但大部分还是以血...
  • 如何选择ELISA试剂盒?

    2023-10-17 酶联免疫吸附试验(Enzyme-linkedImmunosorbentAssay,ELISA)技术从1970年代发展至今已近半个世纪,是一项实验室最基本的免疫检测技术,被广泛的应用于基础研究和临床检验。那么面对市面上数以千计的试剂盒,数百家供应商,该如何选择适合的ELISA试剂盒呢?让我们一起来看看吧!一、明确研究种属一般来说,厂家都会在产品名称上标明种属,且为shou个单词,检索种属的常用语言为英文。如果您需对不同物种的同一因子进行定量,建议优先寻找适用于多个种属的ELIS...
  • ELISA样本处理的注意事项有什么?

    2023-10-17 ELISA的检测目的是为了实验提供准确的实验依据,为了保证实验数据的可靠性,在实验过程中必须坚持全面的质量控制和全过程质量控制,在收集标本前都必须有一个完整的计划。那么你知道ELISA样本处理的注意事项有什么吗?让我们一起来看看吧!一、每个样本量收集体积=100ulx检测种类,如果要做复孔,标本量收集体积=100ulx检测种类x2。二、样本收集后若在一周内进行检测可保存于2-8°C,若不及时检测,请进行分装,冻存于-20°或-80°C,避免反复冻融。三、试剂盒的检测范围不等同...
  • 蛋白检测条带的常见问题有哪些?如何解决?

    2023-10-16 你知道在蛋白检测中条带的常见问题有哪些?该如何解决吗?让我们一起来看看吧!一、条带出现位置比预期低或高①当条带出现位置比预期低:原因:目的蛋白经过剪切或降解,有相同或相似抗原表位的蛋白被抗体检测出解决办法:样品准备时候要在冰上操作;加入更过蛋白酶抑制剂;更换别的抗体②当条带出现位置比预期略高:原因1:蛋白可能被糖基化,或氨基酸基被修饰解决办法:使用酶去除可能的蛋白修饰;检查抗原序列原因2:可能有融合蛋白解决办法:查看表达序列原因3:蛋白形成二聚体或多聚体解决办法:加强变性条件...
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